生物樣品儲存方法之凍干保存
	
	凍干,也稱為冷凍干燥。凍干可以保證大分子的穩(wěn)定性。凍干是一種通用的方法,可用于存儲大分子,如蛋白質(zhì),脂質(zhì)和DNA;微生物如**和酵母等,如果經(jīng)驗足夠豐富,哺乳動物細胞也可以凍干保存。下面簡要介紹下凍干過程。
	 
	 
	 
	為了凍干液體樣品,首先-80℃下冷凍過夜。體積越小,此過程越快,但注意樣品體積應不大于容器容量的35%(例如,對于50ml管,*大樣本量為17.5ml)??梢詫悠穬A斜成一個角度,以增加表面積。
	 
	一旦樣品冷凍,將其置于冰上并迅速覆蓋封口膜,記得在封口膜上戳一些孔。將管放入冷凍瓶中,并將其裝載到凍干機上。這聽起來很明顯,但確保你知道如何運行機器。特別是關閉真空,收集樣品時,如果處理不當,樣品可能被吸出來。要檢查樣品是否完全凍干,可以取出試管并輕輕搖動。如果有殘留的冰存在,會聽到叮當聲。在這種情況下,樣品融化之前,需要將樣品重新放回機器上。
	 
	上述過程適用于可裝配在1.5-50ml管中的樣品。如果你有一個更大的樣品,你可能需要使用殼形冷凍(Shell freezing)。殼形冷凍包括以一定角度旋轉(zhuǎn)含有樣品的燒瓶,同時將其部分浸沒在與干冰混合的甲醇或液氮中。當燒瓶旋轉(zhuǎn)時,內(nèi)容物擴散到燒瓶的表面上,增加表面積并逐層凍結(jié)。增加表面積增加了冷凍干燥的速度??赡苓€需要使用冷凍保護劑,但這又取決于樣品類型了。
	 
	Shell freezing的具體內(nèi)容見下圖:
	 
	 
	圖片來自:SP Scientific
	 
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		如果產(chǎn)品在“靜態(tài)”條件下在燒瓶中冷凍,暴露于低壓的表面積*小化,并且冷凍干燥持續(xù)時間延長
	
	2. 當在其軸上凍結(jié)時,相同的體積,卻具有暴露于低壓的大得多的表面積,并且增強了凍干速率
	3. 較大體積的產(chǎn)品可以通過升高燒瓶高度,旋轉(zhuǎn)凍干。
	4. 較小體積的產(chǎn)品,燒瓶可以直接圍繞瓶軸自轉(zhuǎn)。