Origami B (DE3)化學(xué)感受態(tài)使用說(shuō)明
1、本產(chǎn)品采用干冰運(yùn)輸，收到后請(qǐng)直接凍存于-80℃冰箱。
2、取凍存于-80℃的100μl感受態(tài)細(xì)胞于冰上融化；
3、加入1μl純質(zhì)粒，輕輕吹打混勻，冰浴30min；
4、將菌液放入42℃水浴中熱激45sec，立即放入冰浴中2min；
5、加入900μl SOC/LB培養(yǎng)基，于37℃恒溫?fù)u床上150rpm×45min溫育；
6、將菌液5000rpm×5min離心，棄盡上清；
7、取100μl新鮮LB培養(yǎng)基將菌體打散，均勻涂布于對(duì)應(yīng)抗性平板表面；
8、平板可先正向37℃放置1h,待液體吸收完畢，再倒置37℃培養(yǎng)過(guò)夜。
Origami B (DE3)化學(xué)感受態(tài)基因型
F^- ompT hsdS_B(r_B^- m_B^-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522:: Tn10 trxB (Kan^R, Tet^R)
Origami B (DE3)化學(xué)感受態(tài)菌株介紹
Origami B系列菌株同樣具有Origami系列菌株含有的trxB/gor基因突變，但是該菌株是來(lái)源于BL21的lacZY基因突變株。所以，Origami B系列感受態(tài)細(xì)胞是集合BL21，Tuner和Origami三種細(xì)胞株的優(yōu)點(diǎn)于一身。
在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同時(shí)含有突變，這使得該菌株能夠更加高效的在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵，有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。
TrxB和Gor基因突變使得質(zhì)粒能夠分別具有卡那和四環(huán)素抗性，所以本菌株無(wú)法用于卡那和四環(huán)素抗性質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。
Origami B(DE3)感受態(tài)細(xì)胞來(lái)源于含有l(wèi)acZY基因突變的BL21菌株，能夠通過(guò)IPTG高效控制目的基因的表達(dá)。
形成二硫鍵，促溶蛋白
Origami B (DE3)化學(xué)感受態(tài)注意事項(xiàng)
1、為了您的**和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2、本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗(yàn)室研究，不能用于動(dòng)物，人體以及作為食品添加劑等用途。
3、混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作，感受態(tài)細(xì)胞*好在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
4、涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA總量較多，可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；若轉(zhuǎn)化的DNA總量較少，可取200-300μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計(jì)的克隆數(shù)較少，可通過(guò)離心后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
5、新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
6、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過(guò)少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
7、以上產(chǎn)品均來(lái)源于質(zhì)粒平臺(tái)，各批次質(zhì)粒菌株均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的多重驗(yàn)證，確保正確。如存在質(zhì)量問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏截浳锶齻€(gè)月內(nèi)通知我司，需獲取其他詳細(xì)信息請(qǐng)登錄我司官網(wǎng)聯(lián)系QQ客服查詢。
8、質(zhì)粒平臺(tái)收集整合了國(guó)內(nèi)外諸多科研單位的生物資源，共包含五萬(wàn)余種各類質(zhì)粒菌株。質(zhì)粒平臺(tái)，可享受超低價(jià)眾籌、免費(fèi)保藏、免費(fèi)鑒定、免費(fèi)交換、免費(fèi)郵寄等等超值福利?。?！hz1119 甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基 250g 生化試驗(yàn)培養(yǎng)基，用于**（如金黃色葡萄球菌）甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
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hz1366 明膠培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250g 生化試驗(yàn)培養(yǎng)基，用于**明膠液化試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
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hz1367 綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基 250g 用于綠膿桿菌的綠膿菌素測(cè)定試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
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hz1038 乳糖膽鹽培養(yǎng)基 250g 用于化妝品中糞大腸菌群的測(cè)定（GB標(biāo)準(zhǔn)）
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