ELISA實驗背景色過高的主要原因及解決方法

1、不正確的洗滌

洗滌不充分或省略洗滌步驟中的任何一步均會導致背景色過高。

解決方法：檢查洗滌緩沖液的體積并確保完成所有的洗滌步驟；確保洗滌緩沖液的正確稀釋和正確使用。

2、底物污染

確保在使用前，底物不被金屬離子或氧化劑污染；在實驗時留存一些額外的底物，底物本身不應該有顏色。

3、底物曝光

底物曝光會使底物變成藍色，因此在加入板內(nèi)之前要保存在暗處(即試劑瓶內(nèi))。

4、HRP的錯誤稀釋

HRP濃度過高會造成高背景色，因此要嚴格按照產(chǎn)品說明書稀釋。

5、錯誤的孵育時間和溫度

必須嚴格按照產(chǎn)品說明書來定孵育時間和溫度。

6、包被板保存不當

如果包被板只用了一部分，一定要正確保存剩余的板條。