TRZOL(總RNA提取試劑)(紅)產(chǎn)品介紹
TRZOL試劑是直接從細(xì)胞或組織中提取總RNA的試劑。它在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。加入氯仿后離心,樣品分成水樣層和有機(jī)層。RNA存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后,RNA可以通過異丙醇沉淀來還原。無論是人、動(dòng)物、植物還是**組織,該方法對(duì)少量及大量的組織和細(xì)胞均有較好的分離效果。TRZOL試劑操作上的簡(jiǎn)單性允許同時(shí)處理多個(gè)的樣品。所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。TRZOL抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染。故而能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆。如果是用于PCR,當(dāng)兩條引物位于單一外顯子內(nèi)時(shí),TRZOL(總RNA提取試劑)(紅)建議用擴(kuò)增級(jí)的DNase I來處理抽提的總RNA。 TRZOL試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7 kb和15 kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之間 (tRNA, 5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。
TRZOL(總RNA提取試劑)(紅)產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 質(zhì)量穩(wěn)定。提取出來的RNA與國(guó)外主流公司的Trizol進(jìn)行平行對(duì)照實(shí)驗(yàn),如下游實(shí)驗(yàn):RT-PCR和Northern blot,經(jīng)多個(gè)***和省市級(jí)的重
點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,質(zhì)量和穩(wěn)定性與國(guó)外主流公司的Trizol相當(dāng)。
2. 完整性好。在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。
3. 簡(jiǎn)便快捷。操作上的簡(jiǎn)單性允許同進(jìn)處理多個(gè)樣品,所有的操作可以在一個(gè)小時(shí)內(nèi)完成。
4. 適用性廣。TRzol試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。
TRZOL(總RNA提取試劑)(紅)產(chǎn)品儲(chǔ)存
TRZOL在室溫下能穩(wěn)定保存12個(gè)月。盡管如此,為達(dá)到*佳效果,我們建議保存在2~8°C的環(huán)境下。
注意事項(xiàng)
1. 從少量的組織(1~10mg)或細(xì)胞(102~104)中分離RNA樣品:往組織或細(xì)胞中加入800μl TRZOL。待樣品裂解后,加入氯仿并進(jìn)行步驟2中的
抽提操作。在用異丙醇沉淀RNA之前,加入5~10μg無RNA酶的glycogen作為水樣層的載體。為降低其黏度在加入氯仿前用26號(hào)注射器抽
吸兩次以切斷基因組DNA。Glycogen會(huì)留在水樣層中并和RNA共析出。在濃縮到4mg/ml之前它不會(huì)抑制逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)**鏈的合成也不會(huì)抑
制PCR。
2. 在勻化后和加入氯仿之前,樣品可以在–60~–70°C保存至少一個(gè)月。RNA沉淀 (步驟4,RNA漂洗)溶于75%的乙醇在2~8°C至少可以
保存一周,在–5~–20°C下至少可保存一年。
3. 用TRZOL抽提RNA時(shí)要戴手套和護(hù)眼罩。避免接觸皮膚和衣服。在化學(xué)通風(fēng)櫥完成操作。避免呼吸道吸入。如無例外,所有的操作應(yīng)該在
15~30°C的條件下。
TRZOL(總RNA提取試劑)(紅)實(shí)驗(yàn)圖例
(具體操作詳見說明書)