pGEMX-T Easy 載體連接試劑盒產(chǎn)品介紹
許多高溫DNA聚合酶,如Taq DNA聚合酶、Tth DNA聚合酶等擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物在3’-末端后都帶有一個(gè)突出的堿基A,這樣的PCR產(chǎn)物可以用3’-末端后帶有一個(gè)突出堿基T的載體方便地進(jìn)行克隆。傳統(tǒng)的pGEM-T Easy 載體使用ECOR V切開后加T而成,由于加T不完全或者T頭不穩(wěn)定容易造成自連背景高和克隆效率不穩(wěn)定。 pGEMX-T Easy 載體通過將傳統(tǒng)的pGEM-T Easy載體來源質(zhì)粒ECOR V酶切位點(diǎn)改造為兩個(gè)連續(xù)的XCM I 酶切位點(diǎn),XCM I 酶切后其多克隆位點(diǎn)兩側(cè)的3’末端直接產(chǎn)生未配對(duì)的T堿基而成,因此有更高的重組效率。同時(shí)除了對(duì)ECOR V改造外,傳統(tǒng)的pGEM-T Easy 載體的序列和優(yōu)點(diǎn)完全得到保留,例如兩端獨(dú)特設(shè)計(jì)的兩個(gè)ECOR I位點(diǎn)使插入片段可以用廉價(jià)高效的ECOR I單酶切檢測(cè)。此外,本公司載體連接體系還有背景低(藍(lán)斑小于10%),重組率高(白斑中超過90%有插入片段),可快速連接等特點(diǎn)。
pGEMX-T Easy 載體連接試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 用于連接帶有A尾的PCR產(chǎn)物,進(jìn)行TA克隆。
2. 可以通過藍(lán)白斑顯色進(jìn)行陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子篩選。
3. 陽(yáng)性克隆可以使用通用引物T7和SP6啟動(dòng)子引物進(jìn)行鑒定和測(cè)序。
4. 背景低(藍(lán)斑小于10%),重組率高(白斑中超過90%有插入片段)。 pGEMX-T Easy 載體連接試劑盒
產(chǎn)品儲(chǔ)存
-20 ℃ 保存,反復(fù)凍融至少10次不影響使用質(zhì)量。
pGEMX-T Easy 載體連接試劑盒pGEMX-T Easy載體圖譜
pGEMX-T Easy載體啟動(dòng)子和多克隆位點(diǎn)序列