產(chǎn)品描述
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常利用銀染的方法顯示聚丙烯酰胺凝膠或者瓊脂糖凝膠中的核酸條帶，其檢測原理是：銀離子(Ag+）可與核酸形成穩(wěn)定的復(fù)合物，隨后Ag+ 在堿性環(huán)境下被還原劑如甲醛還原成銀顆粒，后者通過顯色可把核酸電泳條帶染成黑褐色。該方法檢測靈敏度比EB高達(dá)200倍，常用于檢測SSR標(biāo)記、SNP標(biāo)記等。
常規(guī)的銀染方法由固定、氧化、染色、顯影、終止等若干個(gè)步驟組成，操作十分繁瑣，尤其不適用于大批量實(shí)驗(yàn)。而本品的推出可大大改善上述問題，主要體現(xiàn)在：1）超快速，整個(gè)過程僅需20分鐘；2）操作簡單，只有染色和顯影兩步；3）靈敏度跟常規(guī)方法相當(dāng)，比EB高200倍，能檢測到10ng的DNA條帶。4）兩個(gè)成分都是現(xiàn)用現(xiàn)配，可重復(fù)性好。Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid 快速核酸銀染試劑盒
按照本方案提供的配制方法，共可配制試劑A和試劑B分別1000ml。
產(chǎn)品組分
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組分編號(hào)
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組分名稱
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規(guī)格
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外觀
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10801-A
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試劑A 1
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2g
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干粉
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10801-B
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試劑A 2（10×）
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100ml
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液體
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10801-C
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試劑A 3（10×）
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100ml
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液體
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10801-D
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試劑B 1（10×）
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100ml
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液體
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10801-E
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試劑B2
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5ml
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液體
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運(yùn)輸與儲(chǔ)存
常溫運(yùn)輸和保存即可。有效期1年。Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid 快速核酸銀染試劑盒
注意事項(xiàng)
1）為了您的**和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2）銀染主要出現(xiàn)在PAGE膠的表面，因此該方法更適合用于薄膠（0.5-0.75mm）的檢測。
3）染色過程中，緩慢的振蕩是必要的，一般選擇40-60 rpm。
4）凝膠表面的裂紋多是由于壓力、手印及表面干燥所致，所以全程操作中都應(yīng)帶手套。
5）PAGE凝膠背景呈均一的黑色多是水中的雜質(zhì)引起的，所以溶液的配制應(yīng)使用電導(dǎo)率小于1 μS的去離子水。
6） 如果染色后有呈灰塵或煙霧狀灰色或棕色的沉淀出現(xiàn)在凝膠表面，可能是幾步漂洗過程不夠徹底，或染色過程溫度太低。
7）較深的銀染背景多是丙烯酰胺中的雜質(zhì)所致。Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid 快速核酸銀染試劑盒
8）室溫操作時(shí)，溫度的波動(dòng)往往會(huì)干擾銀染的效果，恒溫水浴可以解決這個(gè)問題。
9）染色使用的玻璃器皿必須非常干凈，用酸浸泡可以滿足要求。
10）銀染應(yīng)盡快照相，隨著時(shí)間延長，蛋白條帶會(huì)變淺，而背景會(huì)加深。
11）影響硝酸銀染色效果的因素很多，其使用容器的材質(zhì)也是一個(gè)非常重要的因素。通常玻璃平皿是*理想的銀染容器，其化學(xué)性質(zhì)極其穩(wěn)定，幾乎不與銀染試劑中的任何成分發(fā)生反應(yīng)，且不具有吸附染料的特性。其次是醫(yī)用搪瓷盤，瓷釉為無機(jī)玻璃質(zhì)材料，能耐各種濃度的無機(jī)酸(包括強(qiáng)氧化性酸)、有機(jī)酸、弱堿和強(qiáng)有機(jī)溶劑，但不耐酸、堿介質(zhì)交替使用，而常規(guī)銀染法就是酸堿介質(zhì)交替使用，因此搪瓷盤銀染效果不如玻璃平皿。塑料種類較多，如果塑料是由含氨基官能團(tuán)的有機(jī)物（脲、三聚氰胺或苯代三聚氰胺）與醛類（主要是甲醛）化合物經(jīng)縮聚反應(yīng)而得，則這種塑料會(huì)在堿性溶液中與有強(qiáng)還原作用的甲醛發(fā)生反應(yīng)，進(jìn)而使甲醛消耗，減弱銀離子與蛋白的結(jié)合，降低顯色敏感度和顯色速度。Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid 快速核酸銀染試劑盒
